Alergenul Ara H3, globulina de rezervă 11S din seminţele de arahide 1. Proteoliza limitată cu papaină [Articol]

Abstract

Proteoliza globulinei de rezervă 11S din seminţele de arahide, Ara h3, cu papaină începe cu cuscindarea secvenței C-terminale extinse a α-catenelor, care cuprinde regiunea α-helixurilor. Clivarea ulterioară a buclei dintre β-strendurile E' şi F' din partea centrală a β-barrelui din α-catene duce la formarea fragmentelor, legate cu β-catenele intacte prin legătură disulfidică, precum şi reţinute în molecula globulinei 11S parţial hidrolizată prin interacţiuni necovalente. Conform scenariului proteolizei descrise, acţiunea iniţială a papainei distruge regiunea C-terminală a α-catenelor, în care sunt prezenţi trei din cei patru determinanţi antigenici (epitopii IgE), identificaţi în globulina 11S din arahide. Astfel, gradul de alergenicitate a Ara h3 poate fi substanțial redus prin proteoliza sa limitată cu papaină.

The final product of trypsin nlimited proteolysis of a subunit of storage 11S globulin from peanut seeds Ara h3 (pdb|3c3v) consists of the intact B-chain and B-chain fragments K and N. The fragment K disulfide bonded with the B-chain corresponds to the N-terminal half of the B-barrel (Ile1-Arg109), and the fragment N corresponds to the adjacent C-terminal half (Lys110-Arg213). Identification of the respective B-chain cleavage points is based on the results of electrophoresis,the molecular mass of the residual protein determined using two independent methods, and on the analysis of the level of accessibility of amino acid residues in a model structure of Ara h3 hexamer molecule. The destruction of the B-chain C-terminal region occurs in the course of formation of the fragments K and N. This region containsthree of the four antigen determinants (IgE epitopes) identified in Ara h3. Thus, it seems likely that trypsin limited proteolysis can essentially decrease the allergenicity level of the peanut 11S globulin.