Очистка альфа-амилазы, продуцируемой Aspergillus niger CNMN FD 06, при глубинном культивировании в присутствии наночастиц TiO2 и координационного соединения Sr(II) с полидентатным лигандом

Abstract

Установлено стимулирующее влияние наночастиц TiO2 и координационного соединения Sr(II) с полидентатным лигандом на активность амилазы, синтезируемой штаммом микромицета Aspergillus niger CNMN FD 06 при глубинном культивировании. После очистки гель-фильтрацией на колонке PAD-10 и ионообменной хроматографией на колонке Hi-TrapTMQ отмечено увеличение удельной активности α-амилазы в случае вариантов с добавлением наночастиц TiO2 и координационного соединения Sr(II) до 15523 и 14656 ед./мг соответственно по сравнению с контрольным вариантом – 12037 ед/мг. Выход α-амилаз после очистки также выше на 31 и 20% соответственно по сравнению с контрольным вариантом. Анализ выделенных белков методом SDS-PAGE выявил наличие в активных фракциях двух полос с кажущейся молекулярной массой, равной 65 и 40 kДа, при этом более обильной является полоса с молекулярной массой 65 kДа в случае препарата, полученного с добавлением координационного соединения Sr(II).

The stimulatory effect of TiO2 nanoparticles and of the coordination compound of Sr(II) with a polydentate ligand on the amylase activity was established under submerged cultivation of the micromycete strain Aspergillus niger CNMN FD 06. After purification by gel-filtration on the column of PAD-10 and the ion exchange chromatography on the Hi-TrapTMQ column, an increase in the specific activity of α-amylase in the case of the variants with the addition of TiO2 nanoparticles and coordination compound of Sr(II) up to 15523 and 14656 U/mg, respectively, compared to the control version 12037 U/mg. The yield of α-amylases after purification was also higher, with an increase of 31 and 20%, respectively, compared to that of the control variant. The SDS-PAGE analysis of the isolated proteins revealed the presence of two bands in the active fractions with an apparent molecular mass equal to 65 and 40 kDa, with a more abundant band with a molecular mass of 65 kDa in the case of the preparation obtained with the addition of the Sr(II) coordination compound.